Terapia genowa u pacjenta z chorobą sierpowatą ad

W ciągu 9 lat przed inwazją przeprowadzono średnio średnio 1,6 przypadków zachorowań na sierpowatą. W maju 2014 r. Został zapisany do naszego badania klinicznego. Uzyskano jego ustną zgodę i pisemną zgodę matki. W październiku 2014 r., Gdy pacjent miał 13 lat, otrzymał wlew produktu leczniczego LentiGlobin BB305.
Metody
Przestudiuj badanie
Protokół badania, który jest dostępny wraz z pełnym tekstem tego artykułu, został opracowany przez dwóch ostatnich autorów i Bluebird Bio, sponsora badania. Protokół został poddany przeglądowi przez francuski Comité de Protection des Personnes i odpowiednie instytucjonalne komitety etyczne. Dane kliniczne zostały zebrane przez pierwszego autora, a dane laboratoryjne wygenerował sponsor, ostatni autor i inni autorzy. Autorzy mieli dostęp do wszystkich danych i przeprowadzali ich analizę danych. Pierwszy autor i jeden autor zatrudniony przez sponsora napisał pierwszy szkic manuskryptu, który został merytorycznie poprawiony przez dwóch ostatnich autorów i dalej zredagowany i zatwierdzony przez wszystkich autorów z pomocą pisemną udzieloną przez pracownika sponsora. Autorzy zapewniają rękojmię za dokładność i kompletność danych oraz przestrzeganie protokołu.
Antisickling Gene Therapy Vector
Strukturę wektora L308-L30-BB305 opisano wcześniej (patrz fig. S1 w dodatkowym dodatku, dostępnym w) 12. Ten saminaktywujący się wektor lentiwirusowy koduje ludzki wariant HBB .A-T87Q. Oprócz hamowania polimeryzacji HbS, substytucja T87Q umożliwia ilościowe oznaczanie ilościowe .-globinowej łańcucha hemoglobiny dorosłej (HbA) T87Q za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej z odwróconymi fazami.12.
Procedury przenoszenia genów i transplantacji
Szpik kostny uzyskano dwukrotnie od pacjenta w celu zebrania wystarczających komórek macierzystych do transferu genów i tworzenia kopii zapasowych (odpowiednio 6,2 x 108 na kilogram i 5,4 x 108 na kilogram wszystkich otrzymanych komórek jądrzastych). Obie procedury zostały poprzedzone transfuzją wymiany, a szpik kostny uzyskano bez następstw klinicznych. Niedokrwistość była jedynym niekorzystnym zdarzeniem 3. stopnia zgłoszonym podczas tych procedur. Komórki CD34 + wzbogacone w szpik kostny transdukowano wektorem LentiGlobin BB305 (patrz sekcja Metody w Suplemencie dodatkowym) .13 Średnie liczby kopii wektora dla dwóch partii transdukowanych komórek wynosiły 1,0 i 1,2 kopii na komórkę.
Pacjentów poddano mieloablacji z dożylnym busulfanem (patrz rozdział Metody w Dodatku uzupełniającym). Całkowity obszar busulfanu pod krzywą osiągnął 19 363 .mol na minutę. Po 2-dniowym okresie wymywania infuzji poddano transdukowane komórki CD34 + (5,6 x 106 komórek CD34 + na kilogram). Transfuzje krwinek czerwonych powinny być kontynuowane po przeszczepie aż do wykrycia dużej części HbAT87Q (25 do 30% całkowitej hemoglobiny).
Pacjenta obserwowano w celu wszczepienia; efekty toksyczne (ocenione zgodnie z ogólnymi kryteriami terminologii dla zdarzeń niepożądanych National Cancer Institute, wersja 4.03); liczba kopii wektorowej w całkowitych komórkach krwi obwodowej iw różnych liniach; oznaczanie ilościowe poziomów HbAT87Q, HbS i hemoglobiny płodowej za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej; Mapowanie miejsca integracji DNA za pomocą liniowej reakcji łańcuchowej polimerazy z udziałem przeciwciał w komórkach krwi zarodkowej; i replikacyjną analizę lentiwirusa za pomocą testu immunoenzymatycznego związanego z przeciwciałem p24
[hasła pokrewne: superoptic cena, gastrolit ulotka, centermed bochnia ]

Powiązane tematy z artykułem: centermed bochnia gastrolit ulotka superoptic cena